Calculadora proteína Bradford
Pase de una lectura Bradford a concentración de proteína: absorbancia 0,42 en una curva con pendiente 0,035 e intercepto 0,05 da algo más de diez y medio, en las unidades de sus estándares. Los pocillos diluidos se corrigen. Gratis en su navegador.
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Ejemplo resuelto
- Absorbancia
- 0,42
- Pendiente
- 0,035
- Intersección
- 0,05
- Dilución
- 1
- Concentración
- 10,5714285714
El ensayo de proteína de Bradford sigue siendo uno de los métodos colorimétricos más usados para cuantificar proteína total en muestras purificadas, lisados e intermedios de proceso. Tras la unión del colorante, un espectrofotómetro informa la absorbancia—habitualmente cerca de quinientos noventa y cinco nanómetros—y el laboratorio convierte esa lectura en concentración con una curva estándar construida a partir de estándares de proteína conocidos como BSA. Esta calculadora de concentración de proteína Bradford acepta la absorbancia de muestra corregida con blanco junto con la pendiente y el intercepto de una curva estándar lineal ajustada A igual a m por C más b, multiplica opcionalmente por un factor de dilución cuando el pocillo medido se diluyó, y devuelve la concentración del stock con un contrato numérico redondeado y estable.
Cómo la absorbancia Bradford se convierte en concentración de proteína
El azul brillante de Coomassie G-250 desplaza su espectro de absorbancia al unirse a proteína en condiciones ácidas de ensayo, de modo que los pocillos con más proteína se ven más azules y leen una absorbancia mayor a la longitud de onda del ensayo. La absorbancia absoluta por sí sola no es una concentración universal: el lote del colorante, la temperatura, la longitud de camino, la composición proteica y el blanco del instrumento mueven la respuesta.
Por ello los laboratorios preparan una serie de estándares a concentraciones conocidas, miden sus absorbancias con el mismo protocolo que las incógnitas y ajustan un modelo lineal de la forma absorbancia igual a pendiente por concentración más intercepto en el rango de trabajo lineal. Una vez conocidos la pendiente m y el intercepto b, cualquier absorbancia de muestra A se invierte a la concentración C igual a (A menos b) dividida por m.
Si la muestra se diluyó antes del ensayo—por ejemplo cinco veces para que la lectura quede dentro de la curva estándar—la concentración del stock no diluido es ese valor invertido multiplicado por el factor de dilución. Esta capacidad no ajusta la curva estándar por usted, no promedia réplicas ni aplica modelos logísticos de cuatro parámetros no lineales; aplica la inversión lineal que usted ya confía desde una hoja de cálculo o el software del lector de placas.
La pendiente cero se rechaza porque la división por cero no puede recuperar la concentración. Concentraciones calculadas ligeramente negativas pueden aparecer cuando una muestra ruidosa queda por debajo del intercepto; la aritmética devuelve el número para que los scripts de control de calidad marquen pocillos fuera de rango en lugar de ocultarlos con un recorte silencioso a cero.
Flujos de laboratorio, límites e intención de búsqueda de esta herramienta
Flujo típico: corra estándares de BSA u otra proteína, ajuste la región lineal para obtener pendiente e intercepto, corrija con blanco la absorbancia de la muestra, introduzca esos tres números, indique la dilución cuando el alícuota medido se diluyó y registre la concentración junto al identificador de la muestra. Fracciones de purificación de proteína, controles de carga igual de lisados celulares, preparación de muestras ELISA y laboratorios docentes necesitan la misma inversión determinista sin reabrir una hoja de cálculo.
Límites: esta herramienta no sustituye la necesidad de estándares, no corrige la respuesta no lineal del colorante a alta carga de proteína, no convierte entre equivalentes BSA y masa real del analito para cada especie proteica, y no elige unidades—los resultados van en las unidades de concentración que usó la curva estándar (comúnmente microgramos por mililitro o miligramos por mililitro). Diluya las muestras que lean por encima del estándar más alto hasta el rango lineal y pase el factor de dilución en lugar de extrapolar a ciegas.
La intención de búsqueda de esta página incluye calculadora de concentración de proteína Bradford, absorbancia del ensayo Bradford a concentración, pendiente e intercepto de curva estándar de proteína en línea, y cuantificación de proteína A595 por regresión lineal.
Qué puede hacer con ella
Fracciones de purificación y controles de carga
Convierta cada lectura Bradford A595 con la pendiente y el intercepto de su placa en concentración para fracciones de columna, carga proteica igual y liberación de intermedios de proceso.
Automatización LIMS y lectores de placas
Canalice valores de absorbancia de espectrofotómetro o microplaca hacia una inversión fija de curva estándar lineal guardada por lote de kit, con dilución cuando los pocillos se prediluyeron.
Enseñanza de curvas estándar Bradford
Muestre a los estudiantes cómo A = m·C + b se invierte a C = (A − b)/m, y cómo una dilución 1:5 multiplica por cinco la concentración del stock no diluido.
Preguntas frecuentes
¿Cómo se calcula la concentración de proteína a partir de un ensayo Bradford?
Envíe absorbancia no negativa más la pendiente de la curva estándar lineal (distinta de cero) y el intercepto.
¿Qué son la pendiente y el intercepto?
Provienen del ajuste de sus estándares de proteína: absorbancia ≈ pendiente × concentración + intercepto en el rango lineal. Use el mismo blanco, longitud de onda, camino óptico y unidades para muestras y estándares.
¿Cuándo se debe indicar el campo dilution?
Cuando la absorbancia se midió en un alícuota diluido. Para una dilución 1:5 fije dilution en 5 para que el resultado estime el stock no diluido. Déjelo en 1 para muestras no diluidas.
¿Por qué se rechaza una absorbancia negativa?
Una lectura negativa tras restar el blanco suele indicar un blanco mal hecho o una longitud de onda equivocada, no una cantidad negativa de proteína. La calculadora la rechaza en lugar de cambiarle el signo en silencio.
¿Qué pasa si la pendiente es cero?
Se rechaza, porque la concentración se obtiene dividiendo entre la pendiente y una curva plana no puede convertir absorbancia en cantidad. Vuelva a ajustar los estándares antes de intentarlo de nuevo.
Herramientas relacionadas
Para desarrolladores — acceso por API
Todo lo de esta página está disponible por programación. Esta sección es para equipos que quieren integrarlo en sus sistemas; el resto puede usar la herramienta de arriba sin más.
Endpoint de API
¿Prefiere automatizarlo? Un POST autenticado crea la tarea; el resultado llega por webhook o enlace firmado. La misma capacidad también se ejecuta aquí en la web, por email y desde Telegram — y pronto también desde nuestra app.
Llámela desde su stack
curl -X POST https://api.kit.forhosting.com/bio/bradford-protein \
-H "Authorization: Bearer $KIT_KEY" \
-H "Content-Type: application/json" \
-d '{"absorbance":0.42,"slope":0.035,"intercept":0.05}'const res = await fetch("https://api.kit.forhosting.com/bio/bradford-protein", {
method: "POST",
headers: {
"Authorization": `Bearer ${process.env.KIT_KEY}`,
"Content-Type": "application/json"
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"absorbance": 0.42,
"slope": 0.035,
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const { task_id } = await res.json();import os, requests
res = requests.post(
"https://api.kit.forhosting.com/bio/bradford-protein",
headers={"Authorization": f"Bearer {os.environ['KIT_KEY']}"},
json={
"absorbance": 0.42,
"slope": 0.035,
"intercept": 0.05
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task_id = res.json()["task_id"]<?php
$res = file_get_contents("https://api.kit.forhosting.com/bio/bradford-protein", false, stream_context_create([
"http" => [
"method" => "POST",
"header" => "Authorization: Bearer " . getenv("KIT_KEY") . "\r\nContent-Type: application/json",
"content" => '{"absorbance":0.42,"slope":0.035,"intercept":0.05}',
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]));
$task = json_decode($res, true);body := bytes.NewBufferString(`{"absorbance":0.42,"slope":0.035,"intercept":0.05}`)
req, _ := http.NewRequest("POST", "https://api.kit.forhosting.com/bio/bradford-protein", body)
req.Header.Set("Authorization", "Bearer "+os.Getenv("KIT_KEY"))
req.Header.Set("Content-Type", "application/json")
res, _ := http.DefaultClient.Do(req)Ejemplo de solicitud
{
"absorbance": 0.42,
"slope": 0.035,
"intercept": 0.05
}Ejemplo de respuesta
{
"task_id": "tsk_a1b2c3d4e5f6a1b2c3d4e5f6",
"type": "bio.bradford_protein",
"status": "queued",
"_links": {
"result": "/tasks/tsk_…/result"
}
}La API es asíncrona: la llamada devuelve un task_id al instante y el resultado llega por webhook. El polling está limitado a 1 req/s por tarea.
Precio
Precio publicado — sin tokens ni créditos inventados. Una tarea fallida no se cobra.
Errores
| HTTP | Código | Significado |
|---|---|---|
401 | unauthorized | API key ausente o inválida. |
402 | insufficient_balance | El saldo no cubre el precio de la tarea. |
404 | unknown_type | El tipo de tarea no existe. |
429 | rate_limited | Demasiadas peticiones. Use el webhook en vez de sondear. |
Notas técnicas
Pendiente cero, absorbancia negativa y dilución no positiva fallan con invalid_input en lugar de inventar un título.
Cómo la absorbancia Bradford se convierte en concentración de proteína
La absorbancia corregida con blanco debe ser ya no negativa antes de llamar a la API: una lectura negativa suele indicar un mal blanco o una longitud de onda incorrecta, no una masa de proteína negativa, por lo que la absorbancia negativa se rechaza en lugar de tomar el valor absoluto en silencio.
Contrato de entrada, campos de respuesta y reglas de validación
Ejemplo: absorbancia cero coma cuarenta y dos, pendiente cero coma cero tres cinco, intercepto cero coma cero cinco produce concentración diez coma cinco siete uno cuatro dos ocho cinco siete uno cuatro dos nueve en las unidades de la curva estándar; la misma absorbancia en un alícuota diluida cinco veces con dilución cinco multiplica ese valor invertido por cinco para el stock no diluido. Conserve pendiente e intercepto del mismo ajuste, blanco, longitud de onda y camino óptico que el pocillo de muestra; mezclar curvas entre instrumentos sin renormalizar distorsionará la concentración aunque la aritmética sea correcta. Envíe por POST un cuerpo JSON con tres números finitos obligatorios y un factor opcional. La absorbancia obligatoria es la lectura de muestra corregida con blanco—los alias incluyen od, a595, sample_absorbance, abs y A—y debe ser no negativa. La pendiente obligatoria es el coeficiente lineal m distinto de cero de A igual a m por C más b, con alias m, standard_slope, curve_slope y calibration_slope; las unidades son absorbancia por unidad de concentración y deben coincidir con el ajuste del intercepto y los estándares. El intercepto obligatorio es el intercepto en y finito b, con alias b, standard_intercept, curve_intercept e y_intercept; puede ser positivo, negativo o cero. La dilución opcional vale uno por defecto en mediciones no diluidas; cuando se indica debe ser un factor de dilución finito y positivo (alias dilution_factor, df, fold_dilution, dil). En el éxito la respuesta repite absorbance, slope, intercept y dilution con redondeo estable a doce decimales, más concentration como resultado numérico principal, formula que indica si la dilución fue unitaria, y message como resumen breve en inglés. Campos ausentes, cadenas no finitas, tipos booleanos, absorbancia negativa, pendiente cero y dilución no positiva fallan con invalid_input y no se facturan. El precio del trabajo exitoso es un $0.002 fijo con unidad item.
Flujos de laboratorio, límites e intención de búsqueda de esta herramienta
Los scripts de automatización pueden guardar pendiente e intercepto por placa o por lote de kit y llamar a la API tras cada captura de absorbancia. La validación fallida no consume saldo prepago, así que los scripts exploratorios que prueban pendientes vacías siguen siendo baratos. Las comprobaciones de ida y vuelta son directas: vuelva a calcular (absorbancia menos intercepto) dividido por pendiente por dilución y confirme la igualdad con concentration dentro del redondeo publicado, y luego confirme que pendiente cero o absorbancia negativa pasan la respuesta de éxito a invalid_input con un mensaje de campo claro.
Preguntas técnicas
¿Por qué se rechazó mi solicitud?
Absorbancia negativa, pendiente cero, dilución no positiva, campos ausentes o valores no finitos fallan con invalid_input y no se facturan.
¿Cuánto cuesta la calculadora de concentración de proteína Bradford?
La herramienta del navegador es gratuita. Las solicitudes API usan saldo prepago KIT a $0.002 por llamada exitosa; la entrada inválida no se factura.