حاسبة بروتين برادفورد
حوّل قراءة برادفورد إلى تركيز بروتين: امتصاصية 0.42 على منحنى ميله 0.035 ومقطعه 0.05 تعطي ما يزيد قليلاً على عشرة ونصف، بوحدة المعايير نفسها. وتُصحَّح الآبار المخففة تلقائياً. مجانية في متصفحك.
- مجاني
- يعمل في متصفحك
- دون تسجيل
- بياناتك لا تغادر جهازك
شغّل الأداة مجانًا
مثال محلول
- الامتصاصية
- 0.42
- الميل
- 0.035
- المقطع
- 0.05
- التخفيف
- 1
- التركيز
- 10.5714285714
يظل فحص بروتين برادفورد من أكثر الطرق اللونية شيوعًا لتقدير البروتين الكلي في العينات المنقاة والليسَات ووسائط العملية. بعد ارتباط الصبغة يبلّغ مقياس الطيف الضوئي عن الامتصاص—عادة قرب خمسمئة وخمسة وتسعين نانومترًا—ويحوّل المختبر تلك القراءة إلى تركيز باستخدام منحنى قياسي مبني من معايير بروتين معروفة مثل BSA. تقبل حاسبة تركيز بروتين برادفورد هذه امتصاص العينة المصحح بالفراغ مع ميل ومقطع منحنى قياسي خطي ملائم على الصورة A تساوي m في C زائد b، وتضرب اختياريًا بعامل تخفيف عندما يُخفَّف البئر المقاس، وتعيد تركيز المخزون بعقد رقمي مستدير ومستقر.
كيف يتحول امتصاص برادفورد إلى تركيز بروتين
يزيح أزرق كوماسي اللامع G-250 طيف امتصاصه عند ارتباطه بالبروتين في ظروف فحص حمضية، فتبدو الآبار ذات البروتين الأعلى أكثر زرقة وتقرأ امتصاصًا أعلى عند طول موجة الفحص. الامتصاص المطلق وحده ليس تركيزًا عالميًا: دفعة الصبغة ودرجة الحرارة وطول المسار وتركيب البروتين وفراغ الجهاز تحرّك الاستجابة. لذلك يجهّز المختبر سلسلة معايير بتراكيز معروفة، ويقيس امتصاصاتها بنفس بروتوكول المجهولات، ويلائم نموذجًا خطيًا على صورة الامتصاص يساوي الميل في التركيز زائد المقطع ضمن المدى الخطي للعمل.
بعد معرفة الميل m والمقطع b ينعكس أي امتصاص عينة A إلى التركيز C يساوي (A ناقص b) مقسومًا على m. إذا خُفِّفت العينة قبل الفحص—مثلاً بخمسة أضعاف لتبقى القراءة داخل المنحنى القياسي—فإن تركيز المخزون غير المخفف هو ذلك القيمة المعكوسة مضروبة في عامل التخفيف. لا تلائم هذه القدرة المنحنى القياسي عنكم، ولا تتوسط آبارًا مكررة، ولا تطبق نماذج لوجستية رباعية المعاملات غير خطية؛ بل تطبق العكس الخطي الذي تثقون به أصلًا من جداول البيانات أو برنامج قارئ الصفائح.
يُرفض الميل الصفري لأن القسمة على صفر لا تستعيد التركيز. قد تظهر تراكيز محسوبة سالبة قليلًا عندما تقع عينة ضوضائية دون المقطع؛ وتعيد الحسابات الرقم كي تُعلّم سكربتات مراقبة الجودة الآبار خارج المدى بدل إخفائها بقصّ صامت إلى الصفر.
سير عمل المختبر والحدود ونية البحث لهذه الأداة
السير النموذجي: شغّلوا معايير BSA أو بروتينًا آخر، ولائموا المنطقة الخطية للحصول على الميل والمقطع، وصحّحوا امتصاص العينة بالفراغ، وأدخلوا تلك الأعداد الثلاثة، واضبطوا التخفيف عندما خُفِّفت القسيمة المقاسة، وسجّلوا التركيز بجانب معرّف العينة. كسور تنقية البروتين وفحوصات التحميل المتساوي لليسَات الخلوية وتحضير عينات ELISA ومختبرات التدريس تحتاج نفس العكس الحتمي دون إعادة فتح جدول.
الحدود: لا تغني هذه الأداة عن الحاجة إلى معايير، ولا تصحّح استجابة الصبغة غير الخطية عند حمل بروتين عالٍ، ولا تحوّل بين مكافئ BSA وكتلة التحليل الحقيقية لكل نوع بروتين، ولا تختار الوحدات—النتائج بوحدات تركيز المنحنى القياسي (غالبًا ميكروغرام لكل مليلتر أو مليغرام لكل مليلتر). خفّفوا العينات التي تقرأ فوق أعلى معيار إلى المدى الخطي ومرّروا عامل التخفيف بدل الاستقراء الأعمى. تشمل نية البحث لهذه الصفحة حاسبة تركيز بروتين برادفورد، وامتصاص فحص برادفورد إلى تركيز، وميل ومقطع منحنى قياسي بروتيني عبر الإنترنت، وتقدير بروتين A595 من انحدار خطي.
التحقق الفاشل لا يستهلك الرصيد المدفوع مسبقًا، فتبقي السكربتات الاستكشافية التي تختبر ميولًا فارغة رخيصة.
حالات الاستخدام
كسور التنقية وفحوصات التحميل
حوّلوا كل قراءة برادفورد A595 بميل ومقطع صفيحتكم إلى تركيز لكسور العمود والتحميل البروتيني المتساوي وإطلاق وسائط العملية.
أتمتة LIMS وقارئات الصفائح
وجّهوا قيم امتصاص مقياس الطيف أو الصفيحة الدقيقة إلى عكس ثابت لمنحنى قياسي خطي مخزَّن لكل دفعة عدة، مع تخفيف عندما تُخفَّف الآبار مسبقًا.
تدريس منحنيات برادفورد القياسية
أظهروا للطلاب كيف تنعكس A = m·C + b إلى C = (A − b)/m، وكيف يضاعف تخفيف 1:5 تركيز المخزون غير المخفف بخمسة.
الأسئلة الشائعة
كيف يُحسب تركيز البروتين من فحص برادفورد؟
أرسلوا امتصاصًا غير سالب مع ميل المنحنى القياسي الخطي (غير صفري) والمقطع.
ما الميل والمقطع؟
ينتجان عن ملاءمة معاييركم البروتينية: الامتصاص ≈ الميل × التركيز + المقطع في المدى الخطي. استخدموا نفس الفراغ وطول الموجة وطول المسار والوحدات للعينات والمعايير.
متى يُضبط حقل dilution؟
عندما قيس الامتصاص على قسيمة مخففة. لتخفيف 1:5 اضبطوا dilution على 5 ليقدّر الناتج المخزون غير المخفف. اتركوه 1 للعينات غير المخففة.
لماذا تُرفض الامتصاصية السالبة؟
القراءة السالبة بعد طرح العينة الفارغة تعني غالباً عينة فارغة خاطئة أو طولاً موجياً غير صحيح، لا كمية سالبة من البروتين. لذلك ترفضها الحاسبة بدل قلب إشارتها بصمت.
ماذا يحدث إذا كان الميل صفراً؟
يُرفض، لأن التركيز يُحسب بالقسمة على الميل، والمنحنى المسطح لا يستطيع تحويل الامتصاصية إلى كمية. أعد ملاءمة المعايير ثم حاول مرة أخرى.
أدوات ذات صلة
للمطوّرين — الوصول عبر API
كل ما في هذه الصفحة متاح برمجيًا. هذا القسم موجّه للفرق التقنية التي تريد ربط الأداة بأنظمتها الخاصة؛ بقية المستخدمين يمكنهم استخدام الأداة أعلاه مباشرة دون الحاجة لقراءة ما يلي.
الـEndpoint
صادِق على طلبك بترويسة Bearer، وأرسل طلب POST واحدًا لتدخل مهمتك قائمة التنفيذ فورًا؛ ثم تستلم النتيجة عبر webhook أو رابط موقّع.
استدعِ الخدمة من بيئتك
curl -X POST https://api.kit.forhosting.com/bio/bradford-protein \
-H "Authorization: Bearer $KIT_KEY" \
-H "Content-Type: application/json" \
-d '{"absorbance":0.42,"slope":0.035,"intercept":0.05}'const res = await fetch("https://api.kit.forhosting.com/bio/bradford-protein", {
method: "POST",
headers: {
"Authorization": `Bearer ${process.env.KIT_KEY}`,
"Content-Type": "application/json"
},
body: JSON.stringify({
"absorbance": 0.42,
"slope": 0.035,
"intercept": 0.05
})
});
const { task_id } = await res.json();import os, requests
res = requests.post(
"https://api.kit.forhosting.com/bio/bradford-protein",
headers={"Authorization": f"Bearer {os.environ['KIT_KEY']}"},
json={
"absorbance": 0.42,
"slope": 0.035,
"intercept": 0.05
},
)
task_id = res.json()["task_id"]<?php
$res = file_get_contents("https://api.kit.forhosting.com/bio/bradford-protein", false, stream_context_create([
"http" => [
"method" => "POST",
"header" => "Authorization: Bearer " . getenv("KIT_KEY") . "\r\nContent-Type: application/json",
"content" => '{"absorbance":0.42,"slope":0.035,"intercept":0.05}',
],
]));
$task = json_decode($res, true);body := bytes.NewBufferString(`{"absorbance":0.42,"slope":0.035,"intercept":0.05}`)
req, _ := http.NewRequest("POST", "https://api.kit.forhosting.com/bio/bradford-protein", body)
req.Header.Set("Authorization", "Bearer "+os.Getenv("KIT_KEY"))
req.Header.Set("Content-Type", "application/json")
res, _ := http.DefaultClient.Do(req)مثال على الطلب
{
"absorbance": 0.42,
"slope": 0.035,
"intercept": 0.05
}مثال على الاستجابة
{
"task_id": "tsk_a1b2c3d4e5f6a1b2c3d4e5f6",
"type": "bio.bradford_protein",
"status": "queued",
"_links": {
"result": "/tasks/tsk_…/result"
}
}الواجهة غير متزامنة: تستلم task_id فور الإرسال، ويمكنك الاستعلام عن الحالة بمعدل طلب واحد في الثانية.
الأسعار
السعر معلن كما تراه: لا tokens ولا نظام نقاط؛ وإن فشلت المهمة فلن تُحاسَب عليها.
الأخطاء
| HTTP | الرمز | المعنى |
|---|---|---|
401 | unauthorized | مفتاح الوصول مفقود أو غير صالح؛ تحقق من ترويسة Bearer في طلبك. |
402 | insufficient_balance | رصيدك لا يكفي لتنفيذ هذه المهمة؛ أعد شحن الرصيد ثم أعد المحاولة. |
404 | unknown_type | نوع المهمة المطلوب غير موجود في الكتالوج — راجع الاسم المرسل في الطلب. |
429 | rate_limited | تجاوزت الحد المسموح من الطلبات؛ انتظر قليلًا ثم أعد المحاولة. |
ملاحظات تقنية
الميل الصفري والامتصاص السالب والتخفيف غير الموجب تفشل بـ invalid_input بدل اختراع عيار. وتغذي الحسابات النقية نفسها أداة المتصفح المجانية ومسار API المدفوع مسبقًا بسعر $0.002 لكل استدعاء ناجح، فتتوافق دفاتر المختبر الإلكترونية ووصلات LIMS وأوراق التدريس دائمًا على التركيز المعكوس.
كيف يتحول امتصاص برادفورد إلى تركيز بروتين
يجب أن يكون الامتصاص المصحح بالفراغ غير سالب قبل استدعاء API: القراءة السالبة تعني غالبًا فراغًا سيئًا أو طول موجة خاطئًا لا كتلة بروتين سالبة، لذلك يُرفض الامتصاص السالب بدل أخذ قيمته المطلقة بصمت.
عقد الإدخال وحقول الاستجابة وقواعد التحقق
مثال: امتصاص صفر فاصلة اثنتان وأربعون، ميل صفر فاصلة صفر ثلاثة خمسة، مقطع صفر فاصلة صفر خمسة يعطي تركيزًا عشرة فاصلة خمسة سبعة واحد أربعة اثنان ثمانية خمسة سبعة واحد أربعة اثنان تسعة بوحدات المنحنى القياسي؛ ونفس الامتصاص على قسيمة مخففة خمسة أضعاف مع dilution خمسة يضاعف تلك القيمة المعكوسة بخمسة للمخزون غير المخفف. حافظوا على الميل والمقطع من نفس الملاءمة والفراغ وطول الموجة وطول المسار لبئر العينة؛ خلط المنحنيات بين الأجهزة دون إعادة تقييس سيُخطئ مقياس التركيز حتى لو كانت الحسابات صحيحة. أرسلوا جسم JSON بطريقة POST بثلاثة أعداد منتهية مطلوبة وعامل اختياري. الامتصاص المطلوب هو قراءة العينة المصححة بالفراغ—وتشمل الأسماء البديلة od وa595 وsample_absorbance وabs وA—ويجب أن يكون غير سالب. الميل المطلوب هو المعامل الخطي m غير الصفري من A تساوي m في C زائد b، مع الأسماء البديلة m وstandard_slope وcurve_slope وcalibration_slope؛ والوحدات امتصاص لكل وحدة تركيز ويجب أن تطابق ملاءمة المقطع والمعايير. المقطع المطلوب هو مقطع y المنتهي b، مع الأسماء البديلة b وstandard_intercept وcurve_intercept وy_intercept؛ وقد يكون موجبًا أو سالبًا أو صفرًا. التخفيف الاختياري يساوي واحدًا افتراضيًا للقياسات غير المخففة؛ وعند وجوده يجب أن يكون عامل تخفيف منتهيًا موجبًا (أسماء بديلة dilution_factor وdf وfold_dilution وdil). عند النجاح تعيد الاستجابة absorbance وslope وintercept وdilution مع تقريب مستقر إلى اثنتي عشرة منزلة عشرية، إضافة إلى concentration كنتيجة رقمية أساسية وformula تبيّن إن كان التخفيف واحدًا وmessage كملخص إنجليزي قصير. الحقول الناقصة والسلاسل غير المنتهية والأنواع المنطقية والامتصاص السالب والميل الصفري والتخفيف غير الموجب تفشل بـ invalid_input ولا تُفوتر. سعر العمل الناجح هو $0.002 ثابت بوحدة item.
سير عمل المختبر والحدود ونية البحث لهذه الأداة
يمكن لسكربتات الأتمتة تخزين الميل والمقطع لكل صفيحة أو لكل دفعة عدة واستدعاء API بعد كل التقاط امتصاص. فحوصات الذهاب والعودة مباشرة: أعيدوا حساب (الامتصاص ناقص المقطع) مقسومًا على الميل مضروبًا في التخفيف وتأكدوا من المساواة مع concentration ضمن التقريب المنشور، ثم تأكدوا أن الميل الصفري أو الامتصاص السالب يحوّل الاستجابة من نجاح إلى invalid_input برسالة حقل واضحة.
أسئلة تقنية
لماذا رُفض طلبي؟
الامتصاص السالب والميل الصفري والتخفيف غير الموجب والحقول الناقصة والقيم غير المنتهية تفشل بـ invalid_input ولا تُفوتر.
كم تكلفة حاسبة تركيز بروتين برادفورد؟
أداة المتصفح مجانية. تستخدم طلبات API رصيد KIT المدفوع مسبقًا بسعر $0.002 لكل استدعاء ناجح؛ والإدخال غير الصالح لا يُفوتر.