Serielle Verdünnung

Ein Rechner für serielle Verdünnungsvolumina sagt Ihnen, wie viele Mikroliter Probe Sie überführen und wie viel Verdünnungsmittel Sie in jedes Röhrchen geben, damit jeder Schritt die Verdünnung mit dem gewählten Faktor multipliziert. Bench-Wissenschaftler, ELISA-Plattenansetzer, mikrobiologische Praktika und Assay-Vorbereitungsskripte brauchen dieselbe Identität: das Probenvolumen ist das Röhrchenvolumen geteilt durch den Schritt-Faktor, das Verdünnervolumen ist der Rest. Eine 1:10-Reihe in Röhrchen zu 1 000 µL ist daher 100 µL Probe plus 900 µL Verdünner, wiederholt entlang des Gestells; eine ELISA-Zweifachkurve in Vertiefungen zu 200 µL ist 100 µL plus 100 µL. Dieser Endpunkt wendet diese Identität für jeden endlichen Faktor größer als eins, jedes positive Röhrchenvolumen und eins bis vierundsechzig Schritte an und listet jedes Röhrchen mit der Quelle des Aliquots, der Überführung ins nächste Röhrchen, dem Restvolumen nach dieser Überführung und dem kumulativen Faktor vom Stock. Die optionale Stockkonzentration annotiert bei Angabe jedes Röhrchen mit C0 geteilt durch den Faktor hoch dem Röhrchenindex, sodass ein Laborheft Pipettiervolumina und erwartete Titer in einem Aufruf druckt.

Wie Proben- und Verdünnervolumina für jedes Röhrchen berechnet werden

Eine serielle Verdünnung ist eine Kette identischer Misch-und-Überführungs-Schritte. Sie füllen jedes Röhrchen auf dasselbe Endvolumen V, entnehmen dasselbe Aliquot aus dem vorherigen Röhrchen (oder aus dem Stock für Röhrchen 1) und füllen mit Verdünner auf, sodass das Aliquot genau ein Teil in f der fertigen Mischung ist. Das ist der Verdünnungsfaktor je Schritt: das Probenvolumen ist V geteilt durch f, das Verdünnervolumen ist V mal (f minus 1) geteilt durch f.

Eine 10-fach-Reihe in Röhrchen zu 1 000 Mikrolitern verwendet daher 100 Mikroliter Probe und 900 Mikroliter Verdünner in jedem Röhrchen; eine ELISA-Zweifachkurve in Vertiefungen zu 200 Mikrolitern verwendet 100 plus 100. Nach dem Mischen von Röhrchen i überführen Sie dasselbe Probenvolumen in Röhrchen i plus 1, sodass jedes Zwischenröhrchen mit Restvolumen V minus Aliquot bleibt, numerisch gleich dem Verdünnervolumen. Das letzte Röhrchen ist keine Quelle für eine weitere Überführung und behält daher das volle Volumen.

Der kumulative Faktor bei Röhrchen i ist f hoch i, sodass vier 10-fach-Schritte 10 000-fach vom Stock erreichen und acht Zweifach-Schritte 256-fach. Dieser Rechner wendet diese Identität für jeden endlichen Faktor größer als eins und jedes positive Röhrchenvolumen an und listet jedes Röhrchen mit Quelle, den zwei Pipettiervolumina, der Abgabe, dem Rest und dem kumulativen Faktor. Er wählt weder Pipettengröße noch Mischzeit noch Pufferrezept; das gehört in Ihr SOP.

Er kehrt das Problem auch nicht in eine reine Konzentrationsreihe um: das ist eine andere Suche, beantwortet von einer Schwester, die von einem Stocktiter statt von einem Röhrchenvolumen ausgeht.

Wo ein Rechner für serielle Verdünnungsvolumina seinen Nutzen zeigt

Lehrlabore und Mikrobiologiekurse nutzen einen Rechner für serielle Verdünnungsvolumina, damit Studierende aufhören, 100 plus 900 zu raten, und die Identität für einen beliebigen Faktor und ein beliebiges Röhrchenvolumen zeigen können, einschließlich des Rests nach der Überführung ins nächste Röhrchen. ELISA- und Potenzassay-Hefte halten dieselbe Zweifach-Well-Arithmetik neben einer Plattenkarte, wenn eine Vertiefung zu 200 Mikrolitern 100 Mikroliter Probe und 100 Mikroliter Verdünner für acht Schritte braucht und im letzten Well 256-fach erreicht.

Hochdurchsatz-Assayskripte, CFU-Zählgestelle, qPCR-Standardkurvenblätter und LMS-Hausaufgabenorakel brauchen ein deterministisches parse, das einen Faktor von eins oder ein fehlendes Röhrchenvolumen zurückweist, statt durch null zu teilen oder still Infinity zurückzugeben. Eine fehlgeschlagene Prüfung wird nicht berechnet.