Volúmenes de dilución seriada

Una calculadora de volúmenes de dilución seriada indica cuántos microlitros de muestra debe transferir y cuánto diluyente debe añadir en cada tubo para que cada paso multiplique la dilución por el pliegue elegido. Quienes trabajan en el banco, montan placas ELISA, imparten prácticas de microbiología o escriben scripts de preparación de ensayos necesitan la misma identidad: el volumen de muestra es el volumen del tubo dividido por el factor de cada paso, y el volumen de diluyente es el resto. Una serie 1:10 en tubos de 1 000 µL es, por tanto, 100 µL de muestra más 900 µL de diluyente, repetida a lo largo de la gradilla; una curva ELISA al doble en pocillos de 200 µL es 100 µL más 100 µL. Este extremo aplica esa identidad para cualquier factor finito mayor que uno, cualquier volumen de tubo positivo y de uno a sesenta y cuatro pasos, y enumera cada tubo con el origen de la alícuota, la transferencia al tubo siguiente, el volumen residual tras esa transferencia y el pliegue acumulado desde la disolución madre. La concentración opcional de partida, si se indica, anota cada tubo con C0 dividido por el factor elevado al índice del tubo, de modo que el cuaderno de laboratorio imprima a la vez los volúmenes de pipeta y los títulos esperados en una sola llamada.

Cómo se calculan los volúmenes de muestra y diluyente en cada tubo

Una dilución seriada es una cadena de pasos idénticos de mezcla y transferencia. Usted llena todos los tubos hasta el mismo volumen final V, toma la misma alícuota del tubo anterior (o de la disolución madre en el tubo 1) y completa con diluyente para que esa alícuota sea exactamente una parte en f de la mezcla terminada. Ese es el factor de dilución por paso: el volumen de muestra es V dividido por f, y el de diluyente es V por (f menos 1) dividido por f.

Una serie de 10 pliegues en tubos de 1 000 microlitros usa, por tanto, 100 microlitros de muestra y 900 microlitros de diluyente en cada tubo; una curva ELISA al doble en pocillos de 200 microlitros usa 100 más 100. Tras mezclar el tubo i transfiere el mismo volumen de muestra al tubo i más 1, de modo que cada tubo intermedio queda con un volumen residual V menos la alícuota, numéricamente igual al volumen de diluyente.

El último tubo no es origen de otra transferencia, así que conserva el volumen completo. El pliegue acumulado en el tubo i es f elevado a i, de modo que cuatro pasos de 10 pliegues alcanzan 10 000 veces desde la madre y ocho pasos al doble alcanzan 256 veces. Esta calculadora aplica esa identidad para cualquier factor finito mayor que uno y cualquier volumen de tubo positivo, y enumera cada tubo con su origen, los dos volúmenes de pipeta, la transferencia de salida, el residual y el pliegue acumulado.

No elige el tamaño de pipeta, el tiempo de mezcla ni la receta de tampón; eso corresponde a su SOP. Tampoco invierte el problema en una serie solo de concentraciones: esa es otra búsqueda, resuelta por una hermana que parte de un título de madre y no de un volumen de tubo.

Dónde aporta valor una calculadora de volúmenes de dilución seriada

Los laboratorios docentes y los cursos de microbiología usan una calculadora de volúmenes de dilución seriada para que el alumnado deje de adivinar 100 más 900 y pueda mostrar la identidad para un factor y un volumen de tubo arbitrarios, incluido el residual tras transferir al tubo siguiente.

Los cuadernos de ELISA y de ensayos de potencia mantienen la misma aritmética al doble junto al mapa de placa cuando un pocillo de 200 microlitros necesita 100 microlitros de muestra y 100 microlitros de diluyente durante ocho pasos, hasta 256 veces en el último pocillo.

Los scripts de ensayo de alto rendimiento, las gradillas de recuento CFU, las hojas de curva patrón de qPCR y los oráculos de deberes de un LMS necesitan un parse determinista que rechace un factor de uno o un volumen de tubo ausente en vez de dividir entre cero o devolver Infinity en silencio.

Los sitios de contenido que posicionan por una calculadora de volúmenes de dilución seriada se benefician de un control en vivo cuyo camino gratuito en el navegador coincide con el de automatización prepago sobre el mismo módulo puro, y no deben canibalizar la búsqueda distinta de una calculadora de concentración en cada paso: esa consulta quiere títulos a partir de una concentración madre, no volúmenes de pipeta a partir de un volumen de tubo. La validación fallida no consume saldo.