Volumi di diluizione seriale

Un calcolatore dei volumi di diluizione seriale indica quanti microlitri di campione Lei deve trasferire e quanto diluente aggiungere in ogni tubo affinché ciascun passo moltiplichi la diluizione per il fattore scelto. Chi lavora al banco, allestisce piastre ELISA, tiene esercitazioni di microbiologia o scrive script di preparazione saggi ha bisogno della stessa identità: il volume di campione è il volume del tubo diviso per il fattore di ciascun passo, e il volume di diluente è il resto. Una serie 1:10 in tubi da 1 000 µL è dunque 100 µL di campione più 900 µL di diluente, ripetuta lungo la rastrelliera; una curva ELISA al doppio in pozzetti da 200 µL è 100 µL più 100 µL. Questo servizio applica tale identità per qualsiasi fattore finito maggiore di uno, qualsiasi volume di tubo positivo e da uno a sessantaquattro passi, e elenca ogni tubo con la fonte dell'aliquota, il trasferimento al tubo successivo, il volume residuo dopo quel trasferimento e il fattore cumulato dallo stock. La concentrazione di stock facoltativa, se fornita, annota ogni tubo con C0 diviso per il fattore elevato all'indice del tubo, così il quaderno di laboratorio stampa in una sola chiamata sia i volumi di pipetta sia i titoli attesi.

Come si calcolano i volumi di campione e diluente per ciascun tubo

Una diluizione seriale è una catena di passi identici di mescolamento e trasferimento. Lei riempie tutti i tubi fino allo stesso volume finale V, preleva la stessa aliquota dal tubo precedente (o dallo stock per il tubo 1) e completa con diluente affinché quell'aliquota sia esattamente una parte in f della miscela finita. Questo è il fattore di diluizione per passo: il volume di campione è V diviso per f, e quello di diluente è V per (f meno 1) diviso per f.

Una serie a 10 volte in tubi da 1 000 microlitri usa dunque 100 microlitri di campione e 900 microlitri di diluente in ogni tubo; una curva ELISA al doppio in pozzetti da 200 microlitri usa 100 più 100. Dopo aver mescolato il tubo i Lei trasferisce lo stesso volume di campione nel tubo i più 1, così ogni tubo intermedio resta con volume residuo V meno l'aliquota, numericamente uguale al volume di diluente. L'ultimo tubo non è fonte di un ulteriore trasferimento, perciò conserva il volume pieno.

Il fattore cumulato al tubo i è f elevato a i, così quattro passi a 10 volte raggiungono 10 000 volte dallo stock e otto passi al doppio raggiungono 256 volte. Questo calcolatore applica tale identità per qualsiasi fattore finito maggiore di uno e qualsiasi volume di tubo positivo, e elenca ogni tubo con la fonte, i due volumi di pipetta, il trasferimento in uscita, il residuo e il fattore cumulato.

Non sceglie la taglia della pipetta, il tempo di mescolamento né la ricetta del tampone; ciò spetta al Suo SOP. Non inverte nemmeno il problema in una serie solo di concentrazioni: è una ricerca diversa, risolta da una sorella che parte da un titolo di stock e non da un volume di tubo.

Dove un calcolatore dei volumi di diluizione seriale rende servizio

I laboratori didattici e i corsi di microbiologia usano un calcolatore dei volumi di diluizione seriale perché gli studenti smettano di indovinare 100 più 900 e possano mostrare l'identità per un fattore e un volume di tubo arbitrari, compreso il residuo dopo il trasferimento al tubo successivo.

I quaderni ELISA e dei saggi di potenza tengono la stessa aritmetica al doppio accanto alla mappa della piastra quando un pozzetto da 200 microlitri richiede 100 microlitri di campione e 100 microlitri di diluente per otto passi, fino a 256 volte nell'ultimo pozzetto.

Gli script di saggio ad alto rendimento, le rastrelliere di conta CFU, i fogli di curva standard qPCR e gli oracoli dei compiti di un LMS necessitano di un parse deterministico che rifiuti un fattore pari a uno o un volume di tubo assente invece di dividere per zero o restituire Infinity in silenzio. Una convalida fallita non consuma il saldo.