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Calculadora de copias de rendimiento PCR

Vea hasta dónde puede llegar una PCR en teoría: 100 copias iniciales tras 30 ciclos al 100 % de eficiencia dan 107 374 182 400 copias del amplicón, unas 1,073742 × 10¹¹. Baje la eficiencia y verá cuánto cae ese techo. Gratis en su navegador.

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Si escribe
Copias de la plantilla
100
Ciclos
30
Eficiencia (%)
100
Obtiene
Eficiencia
1
Amplificación (veces)
1 073 741 824
Copias del producto
107 374 182 400
Log10 de copias del producto
11,0308998699

La reacción en cadena de la polimerasa multiplica un molde de ADN inicial mediante ciclos repetidos de desnaturalización, hibridación y extensión. Cada ciclo exitoso multiplica el producto anterior por uno más la eficiencia por ciclo, de modo que el número teórico de copias tras n ciclos es el recuento de molde inicial por (uno más E) elevado a n. Esta calculadora de copias de rendimiento PCR aplica exactamente esa exponencial de forma cerrada: usted indica el número de copias de molde, el recuento de ciclos y, si lo desea, la eficiencia en por ciento (cien por ciento significa duplicación perfecta). Devuelve las copias de producto teóricas, la amplificación por pliegue, el logaritmo en base diez de las copias y una cadena compacta en notación científica para el cuaderno. Es un modelo exponencial teórico; no ajusta meseta, agotamiento de cebadores ni muerte enzimática.

Qué significa el rendimiento teórico de copias PCR

El rendimiento teórico del producto PCR en número de copias sigue el mapa exponencial N igual a N-cero por (uno más E) elevado a n, donde N-cero es el número de moléculas de molde presentes al iniciar la ciclación, n es el número de ciclos térmicos completados y E es la eficiencia de amplificación por ciclo expresada como fracción entre cero y uno.

Cuando la eficiencia es cien por ciento, E vale uno y la fórmula se reduce a la ley familiar de duplicación N igual a N-cero por dos elevado a n: treinta ciclos desde cien copias iniciales producen cien veces dos a la treinta, es decir, ciento siete mil trescientos setenta y cuatro millones ciento ochenta y dos mil cuatrocientas moléculas teóricas de amplicón.

Cuando la eficiencia es noventa por ciento, el multiplicador de cada ciclo es uno coma nueve en lugar de dos, de modo que esos mismos treinta ciclos rinden muchas menos copias que la curva ideal de duplicación. Una eficiencia de cero por ciento significa que el molde no se copia: el pliegue de amplificación es uno y el recuento de producto iguala el recuento inicial. El ciclo cero está permitido y simplemente devuelve el molde de partida, útil cuando desea comprobar en el cuaderno que la calculadora no inventa amplificación.

El modelo es de forma cerrada y determinista; no simula cada ciclo como un proceso estocástico de ramificación, no consume desoxinucleótidos y no entra en meseta. Las reacciones reales abandonan la fase exponencial cuando cebadores, polimerasa o nucleótidos se vuelven limitantes, así que trate la salida como un techo teórico y no como una predicción de lector de placas. Use esta página cuando la intención de búsqueda sea rendimiento PCR en copias, número de copias de amplicón tras n ciclos o amplificación PCR teórica desde un recuento de molde conocido.

Flujos de trabajo, límites e intención de búsqueda

Los laboratorios de clonación usan ese techo para decidir si treinta o treinta y cinco ciclos pueden alcanzar en teoría una banda visible desde un molde escaso. Quienes desarrollan métodos comparan la curva ideal (uno más E) elevado a n con los ciclos de cuantificación observados para ver cuánto se apartó la reacción del crecimiento exponencial.

Los laboratorios docentes pueden fijar la eficiencia en cien por ciento para que el alumnado se centre en la ley de duplicación y luego bajarla a ochenta o noventa por ciento para mostrar cómo una pérdida pequeña por ciclo se acumula a lo largo de un programa completo.

Límites: esta herramienta no convierte copias a nanogramos (eso exige longitud de amplicón y masa media por par de bases), no invierte un ciclo de cuantificación hacia la cantidad inicial, no ajusta una meseta logística de cinco parámetros y no recomienda temperaturas de hibridación. La intención de búsqueda de esta página incluye calculadora de copias de rendimiento PCR, número teórico de copias de amplicón, copias de ADN tras ciclos PCR y rendimiento de amplificación desde el molde inicial.

Planificación de rendimiento en PCR de punto final y clonación

Convierta un recuento conocido de molde inicial en un techo teórico de copias de amplicón tras 25–35 ciclos para juzgar si un inserto escaso puede alcanzar una banda visible.

Techo teórico al desarrollar un método qPCR

Compare una curva de amplificación observada con la predicción de forma cerrada N = N0 × (1 + E)^n para ver cuándo la reacción abandonó la fase exponencial.

¿Qué eficiencia debo utilizar?

Use 100 para un techo teórico de duplicación (N = N0 × 2^n). En un ensayo realista, indique el por ciento de eficiencia de una curva estándar qPCR (por ejemplo 90 o 95). Envíe 95, no 0.95.

¿Esta calculadora incluye la meseta de la PCR?

No. El resultado es la exponencial de forma cerrada N = N0 × (1 + E)^n. Las reacciones reales abandonan el crecimiento exponencial cuando los reactivos se agotan; trate la cifra como un techo teórico.

¿Cuántas copias producen 30 ciclos de PCR a partir de 100 copias de molde?

Con un 100 % de eficiencia cada ciclo duplica el producto, así que 100 copias se convierten en 107 374 182 400 tras 30 ciclos, una amplificación de 1 073 741 824 veces. Las reacciones reales se estancan antes: tómelo como un techo teórico.

¿La eficiencia se escribe en porcentaje o como fracción?

En porcentaje. Escriba el porcentaje tal cual, donde 100 significa duplicación perfecta; una fracción entre cero y uno en esa casilla se leería como una reacción casi fallida y daría muchísimas menos copias.

¿Qué ocurre con cero ciclos o un 0 % de eficiencia?

En ambos casos se devuelven las copias iniciales. Con cero ciclos aún no ha pasado nada y con un 0 % no se copia nada, así que la amplificación es 1. Es una buena comprobación de que no se inventa amplificación.

Todo lo de esta página está disponible por programación. Esta sección es para equipos que quieren integrarlo en sus sistemas; el resto puede usar la herramienta de arriba sin más.

POSThttps://api.kit.forhosting.com/bio/pcr-amplicon-copies

¿Prefiere automatizarlo? Un POST autenticado crea la tarea; el resultado llega por webhook o enlace firmado. La misma capacidad también se ejecuta aquí en la web, por email y desde Telegram — y pronto también desde nuestra app.

curl -X POST https://api.kit.forhosting.com/bio/pcr-amplicon-copies \
  -H "Authorization: Bearer $KIT_KEY" \
  -H "Content-Type: application/json" \
  -d '{"template_copies":100,"cycles":30}'
{
  "template_copies": 100,
  "cycles": 30
}
{
  "task_id": "tsk_a1b2c3d4e5f6a1b2c3d4e5f6",
  "type": "bio.pcr_amplicon_copies",
  "status": "queued",
  "_links": {
    "result": "/tasks/tsk_…/result"
  }
}

La API es asíncrona: la llamada devuelve un task_id al instante y el resultado llega por webhook. El polling está limitado a 1 req/s por tarea.

Por solicitud$0.002

Precio publicado — sin tokens ni créditos inventados. Una tarea fallida no se cobra.

max_cycles80
HTTPCódigoSignificado
401unauthorizedAPI key ausente o inválida.
402insufficient_balanceEl saldo no cubre el precio de la tarea.
404unknown_typeEl tipo de tarea no existe.
429rate_limitedDemasiadas peticiones. Use el webhook en vez de sondear.

Las entradas inválidas fallan con invalid_input y no se facturan.

Contrato de entrada, campos de respuesta y validación

El mismo recuento inicial al noventa por ciento usa base uno punto nueve y un producto menor. No envíe la eficiencia como fracción de cero a uno en el campo de por ciento: noventa y cinco por ciento es 95, no 0.95. Envíe por POST un cuerpo JSON con template_copies obligatorio como recuento de copias inicial finito y positivo —alias n0, starting_copies, initial_copies y n_zero— y cycles obligatorio como entero de cero a ochenta (alias n, pcr_cycles, cycle_count). El opcional efficiency_percent vale cien por defecto para duplicación perfecta; cuando se indica debe estar entre cero y cien inclusive (alias efficiency_pct, percent_efficiency, e_percent). Ejemplo: cien copias iniciales, treinta ciclos y cien por ciento de eficiencia devuelve un pliegue de dos a la treinta y product_copies igual a cien veces ese pliegue. En caso de éxito la respuesta devuelve template_copies, cycles y efficiency_percent con redondeo estable a doce decimales, más efficiency como la fracción E, fold_amplification como (uno más E) elevado a n, product_copies como rendimiento teórico principal, log10_product_copies para gráficos en escala logarítmica, product_copies_scientific como cadena científica compacta, formula que reitera N igual a N0 por (uno más E) elevado a n, y un message breve. Campos ausentes, cadenas no finitas, tipos booleanos, template_copies no positivo, cycles no entero, cycles fuera de cero a ochenta y efficiency_percent fuera de cero a cien fallan con invalid_input y no se facturan. El trabajo exitoso se cobra a un fijo $0.002 con unit item.

Flujos de trabajo, límites e intención de búsqueda

Flujo típico: convierta una masa de molde conocida o un recuento de PCR digital en copias iniciales, elija el número de ciclos que piensa correr o que ya corrió, fije efficiency_percent desde una estimación de curva estándar de PCR cuantitativa o déjelo en cien para un techo teórico de duplicación, y anote product_copies o product_copies_scientific junto al protocolo. La validación fallida no consume saldo prepago. Las comprobaciones de ida y vuelta son directas: vuelva a calcular template_copies por (uno más efficiency_percent entre cien) elevado a cycles y confirme la igualdad con product_copies dentro del redondeo publicado; luego confirme que un template_copies ausente pasa la respuesta de éxito a invalid_input con un mensaje de campo claro.

Enseñar la ley de duplicación y la pérdida de eficiencia

Muestre al alumnado que 100% de eficiencia es N0 × 2^n y luego baje efficiency_percent a 90 para demostrar cómo una pérdida pequeña por ciclo se acumula en un programa PCR completo.

¿Cómo calculo las copias teóricas de producto PCR?

Envíe template_copies positivo y cycles entero (0–80). El opcional efficiency_percent vale 100 por defecto. La API devuelve product_copies = template_copies × (1 + E)^n con E = efficiency_percent / 100.

¿Por qué se rechazó mi solicitud?

Faltan template_copies o cycles, copias iniciales no positivas, cycles no entero, cycles fuera de 0–80, o efficiency_percent fuera de 0–100: fallan con invalid_input y no se facturan.

¿Cuánto cuesta la calculadora de copias de rendimiento PCR?

La herramienta del navegador es gratuita. Las peticiones API usan saldo prepago KIT a $0.002 por llamada exitosa; la entrada inválida no se factura.

Ver la documentación completa del KIT →